Güçlü Hassasiyet Sıçan ELISA Kiti, Yüksek Özgünlük MBL Sandviç Elisa Test Kiti 96 Wells

Güçlü Hassasiyet Rat MBP ELISA Test Kiti Yüksek Spesifiklik MBL Sandwich ELISA Kiti 96 Wells

Bir s der P rinciple

Bu kit Enzim Bağlantılı İmmünosorbent Tahlilidir (ELISA). Plaka, Rat MBP / MBL antikoru ile önceden kaplanmıştır. Örnekte mevcut olan MBP / MBL eklenir ve oyuklarda kaplanan antikorlara bağlanır. Ve sonra biyotinile edilmiş Rat MBP / MBL Antikoru eklenir ve örnekteki MBP / MBL'ye bağlanır. Daha sonra Streptavidin-HRP eklenir ve Biotinylated MBP / MBL antikoruna bağlanır. İnkübasyondan sonra bağlanmamış Streptavidin-HRP bir yıkama basamağı sırasında yıkanır. Substrat çözeltisi daha sonra ilave edilir ve sıçan MBP / MBL miktarıyla orantılı olarak renk gelişir. Reaksiyon, asidik durdurma çözeltisi ilave edilerek sonlandırılır ve absorbans, 450 nm'de ölçülür.

Cat.No E 0629 Ra

Standart Eğri Aralığı : 0.5ng / ml - 100ng / ml

Hassasiyet : 0.25ng / ml

Boyut : 96 kuyu

Saklama : Reaktifleri 2-8 ° C'de saklayın. 6 aydan fazla depolama için son kullanma tarihine bakın -20 ° C'de tutun. Tekrarlanan çözülme döngülerinden kaçının. Bireysel reaktifler açılırsa kitin 1 ay içinde kullanılması önerilir.

* Bu ürün sadece araştırma amaçlıdır, tanı prosedürlerinde kullanılmaz. Kullanmadan önce bu talimatları tamamen okumanızı tavsiye ederiz.

P önlemler

• Kullanımdan önce, kit ve numune doğal olarak 30 dakika oda sıcaklığına ısıtılmalıdır.
• Bu talimat kesinlikle deneyde takip edilmelidir.
• İstenilen sayıda şerit çıkarıldıktan sonra, kalıntının bozulmaması için derhal torbayı tekrar kapatın. Kullanılmadığında tüm reaktifleri örtün.
• Pipetleme reaktiflerini pipetleme sırasına ve pipetleme sırasında kuyucuktan kuyucuğa ekleme oranına dikkat edin.
• Eldeki pipet uçları ve plaka kapatıcı, çapraz kontaminasyonu önlemek için temiz ve tek kullanımlık olmalıdır.
• Farklı partilerin reaktiflerini birlikte kullanmaktan kaçının.
• Substrat çözeltisi B ışığa duyarlıdır, substrat çözeltisi B'yi uzun süre ışığa maruz bırakmayın.
• Durdurma çözeltisi asit içerir. Lütfen bu malzemeyi kullanırken göz, el ve cilt koruması kullanın. Kit reaktifiyle cilt veya mukoza zarlarına temas etmekten kaçının.
• Kit son kullanma tarihinden sonra kullanılmamalıdır.

R eagent P rovided

M aterial R eşit B a N r Sağlanan

• 37 ° C ± 0.5 ° C inkübatör
• Emici kağıt
• Hassas pipetler ve tek kullanımlık pipet uçları
• Temiz tüpler
• Deiyonize veya distile su
• 450 ± 10nm dalga boyu filtreli mikroplaka okuyucu

Örnek toplama

Serum Serum oda sıcaklığında 10-20 dakika pıhtılaşmaya bırakılır. 20 dakika 2000-3000 RPM'de santrifüjleyin.

Plazma Antikoagülan olarak EDTA veya heparin kullanarak plazma toplayın. 2000 - 3000 RPM'de 15 dakika boyunca 2 - 8 ° C'de 30 dakika içinde santrifüjleyin.

İdrar Steril tüp ile toplayın. 2000-3000 RPM'de yaklaşık 20 dakika santrifüjleyin. Plöroperitoneal sıvı ve beyin omurilik sıvısı toplarken, lütfen yukarıda belirtilen prosedürleri izleyin.

Hücre Kültürü S upernatant Sekrete bileşenleri incelerken steril tüplerle toplayın. 2000-3000 RPM'de yaklaşık 20 dakika santrifüjleyin. Süpernatantları dikkatlice toplayın. Hücre içindeki bileşenleri incelerken, hücre süspansiyonunu yaklaşık 1 milyon / ml hücre konsantrasyonuna kadar seyreltmek için PBS (pH 7.2-7.4) kullanın. İç bileşenleri dışarıda bırakmak için tekrarlanan donma-çözülme döngüleri boyunca hücrelere zarar verin. 2000-3000 RPM'de yaklaşık 20 dakika santrifüjleyin.

Doku Aşırı kanın iyice alınması ve homojenleştirmeden önce tartılması için PBS'deki dokuları (pH 7.4) çalkalayın. Dokuları kıyın ve buz üzerinde bir cam homojenleştirici ile PBS (pH 7.4) içinde homojenize edin. 2-8 ° C'de çözün ya da -20 ° C'de dondurun. 2000-3000 RPM'de yaklaşık 20 dakika santrifüjleyin.

Not

• Numune konsantrasyonları tahlilde kullanılmadan önce tahmin edilmelidir. Numune konsantrasyonu standart eğrinin aralığında değilse, kullanıcılar kendi deneyleri için en uygun numuneyi belirlemek için bizimle iletişime geçmelidir.
• 5 gün içinde kullanılacak örnekler 2-8 ° C'de saklanmalıdır. Numuneler alikotlanmalı veya 1 ay içinde -20 ° C'de veya 6 ay içinde -80 ° C'de saklanmalıdır. Tekrarlanan donma çözülme döngülerinden kaçının.
• Teste başlamadan önce numuneler oda sıcaklığına getirilmelidir.
• Kullanmadan önce örnek toplamak için santrifüjleyin.
• NaN3 içeren örnekler, Horse Turp Peroksidazın (HRP) aktivitesini inhibe ettiği için test edilemez.
• Süpernatantları dikkatlice toplayın. Depolama sırasında tortular oluştuğunda, santrifüj tekrar yapılmalıdır.
• Hemoliz, test sonuçlarının geçerliliğini büyük ölçüde etkileyebilir. Hemolizi en aza indirmeye özen gösterin.

* Bu kitle bol miktarda sulandırılamaz . Kiti hazırlamak için kullandığımız malzeme nedeniyle, örnek matris girişimi testin özgüllüğü ve doğruluğunu yanlış şekilde düşürebilir.

Bir s P raketi

1. Tüm reaktifleri, standart çözeltileri ve numuneleri talimatlara uygun şekilde hazırlayın. Kullanmadan önce tüm reaktifleri oda sıcaklığına getirin. Test oda sıcaklığında yapılır.

2. Test için gerekli olan şerit sayısını belirleyin. Şeritleri kullanmak için çerçevelere yerleştirin. Kullanılmayan şeritler 2-8 ° C de saklanmalıdır.

3. Standart kuyuya 50μl standart ekleyin. Not : Standart çözelti biyotinlenmiş antikor içerdiğinden standart kuyucuğa antikor eklemeyin.

4. Numune kuyucuklarına 40μl numune ekleyin ve daha sonra numune kuyucuklarına 10μl anti-MBP / MBL antikoru ekleyin, sonra numune kuyucuklarına ve standart kuyucuklara 50μl streptavidin-HRP ekleyin (Boş kontrol kuyusu değil) İyice karıştırın. Plakayı bir mühürleyici ile örtün. 37 ° C'de 60 dakika inkübe edin.

5. Kapatıcıyı çıkarın ve plakayı 5 kez yıkama tamponu ile yıkayın. Her yıkama için 30 saniye ile 1 dakika arasında en az 0,35 ml yıkama tamponu ile iyice ıslatın. Otomatik yıkama için, tüm kuyucukları aspire edin ve 5 defa yıkayıcı tamponu ile yıkayın, oyukları yıkama tamponu ile doldurun. Plakayı kağıt havluların veya diğer emici malzemelerin üzerine yerleştirin.

6. Her kuyucuğa 50μl substrat çözeltisi A ekleyin ve daha sonra her kuyucuğa 50μl substrat çözeltisi B ekleyin. Karanlıkta 37 ° C'de 10 dakika boyunca yeni bir kapatıcı ile kaplı plaka inkübe edin.

7. Her kuyucuğa 50μl Stop Solüsyonu ekleyin, mavi renk hemen sarıya döner.

8. Durdurma çözeltisini ekledikten sonra 10 dakika içinde 450 nm'ye ayarlanmış bir mikroplaka okuyucu kullanarak derhal her oyuğun optik yoğunluğunu (OD değeri) belirleyin.

Referanslar

"BKCa kanalı için bağlayıcı bir partner ve calmodulin adaptörü olarak miyelin bazik proteini."
Kim H., Jo S., Song HJ, Park ZY, Park CS
Proteomik 7: 2591-2602 (2007)